复方青秦液对尿酸性肾病大鼠肾组织血管紧张素Ⅱ及环氧化酶－2影响的研究

目的探讨复方青秦液对尿酸性肾病大鼠肾组织中血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ,AngⅡ）、环氧化酶－2 （cyclooxygenase-2,COX-2） mRNA转录及蛋白表达水平的影响。方法将SD大鼠按照编号随机取码原则随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组、中药大、中、小剂量组,用腺嘌呤灌胃伴饲酵母造模。空白对照组及模型组每日灌胃蒸馏水;阳性对照组每日灌胃别嘌醇9.33 mg/kg;中药大、中、小剂量组每日给予复方青秦液3.77、1.89、0.09 g/kg灌胃,连续6周。在4周时每组随机部分大鼠（空白组3只,其余每组6只）,6周时处死剩余大鼠,取肾组织采用RT-PCR扩容AngⅡ 和COX-2 mRNA转录水平,采用ELISA测定AngⅡ蛋白表达水平,采用Western blot电泳技术及免疫组化测定COX-2蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,模型组除4周AngⅡ mRNA表达,4、6周时 AngⅡ、COX-2 mRNA及蛋白表达均明显升高（P〈0.01,P〈0.05）。4周时,中药大、中剂量组COX-2蛋白表达明显低于模型组及中药小剂量组（P〈0.05）,阳性对照组COX-2蛋白平均积分光密度值也明显低于模型组（P〈0.01）。6周时,与模型组比较,除中药大剂量组AngⅡ mRNA表达外,阳性对照组及中药各剂量组AngⅡ mRNA及蛋白表达均降低（P〈0.05, P〈0.01）,其中中药大、中剂量组效果优于阳性对照组及中药小剂量组（P〈0.05, P〈0.01）;另外,阳性对照组及中药各剂量组COX-2 mRNA表达、平均积分光密度值以及阳性对照组、中药大、中剂量组COX-2蛋白表达均明显低于模型组（P〈0.05）,其中中药中剂量组COX-2 mRNA表达优于阳性对照组（P〈0.05）,中药大剂量组COX-2蛋白表达优于中药小剂量组（P〈0.05）。结论复方青秦液可以下调尿酸性肾病大鼠肾脏AngⅡ、COX-2 mRNA 转录及蛋白表达水平,从而抑制肾组织炎性病理损伤。     

藤莓汤联合传统改善病情抗风湿药治疗中/高活动度类风湿关节炎患者的疗效观察

目的 观察藤莓汤（Tengmei Decoction, TMD）联合传统改善病情抗风湿药（cDMARDs）治疗中/高活动度类风湿关节炎（RA）患者的临床疗效。方法 选取198例中/高疾病活动度RA患者临床资料进行回顾性分析,根据用药方案分为对照组97例,口服甲氨蝶呤（MTX）、来氟米特（LEF）联合治疗;治疗组101例,口服TMD、MTX、LEF联合治疗,干预时间12周。观察治疗前后28个关节疾病活动评分（DAS28）、RA活动度、28个关节压痛数（TJC28）、28个关节肿胀数（SJC28）、患者对疾病的整体评估（PGA）,类风湿因子（RF）、血沉（ESR）、CRP、PLT情况,同时观察WBC、ALT、AST、BUN、SCr水平。结果 与本组治疗前比较,两组治疗后DAS28、TJC28、SJC28、PGA降低（P<0.01）,对照组CRP、ESR、RF以及治疗组CRP、ESR、RF、PLT水平降低（P<0.01）。与对照组比较,治疗组DAS28、TJC28、SJC28、PGA、CRP及ESR水平降低（P<0.05, P<0.01）。治疗后,治疗组中/高疾病活动度者比例降低,临床缓解及低疾病活动度者比例升高,两组整体比较,差异有统计学意义（Z=-2.308,P=0.021）。治疗组不良反应发生率［2.97% （3/101）］较对照组低［9.28% （9/97）］,但差异无统计学意义（P>0.05）。结论 TMD联合cDMARDs改善中/高活动度RA患者的临床效果优于单纯cDMARDs治疗。     

虎杖对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜PPARγ/ NF-κB信号途径的影响

目的通过观察虎杖对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠踝关节病理及滑膜组织、血清中过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPARγ)、p65、白细胞介素17(IL-17)表达的影响,探讨虎杖抑制类风湿关节炎(RA)滑膜免疫炎性损伤的作用机制。方法采用大鼠尾根部注射牛CⅡ方法制备CIA模型,将成模大鼠按随机数字表法分为模型组、阳性对照组、虎杖2倍剂量组、虎杖常量组,另设正常对照组,每组6只。正常对照组与模型组每天予去离子水10 mL/kg灌胃,阳性对照组每天予来氟米特1.87 mg/kg灌胃,虎杖2倍剂量组、常量组每天分别以8、4 g/kg灌胃,连续干预12周。采用光镜观察各组大鼠踝关节病理改变。运用RT-PCR、Western Blot及ELISA检测技术,观察各组大鼠滑膜组织、血清中PPARγ、p65、IL-17 mRNA及蛋白表达情况。结果与正常对照组比较,模型组大鼠踝关节关节周围纤维组织增生,炎性细胞浸润;与模型组比较,虎杖常量组大鼠关节软骨、关节腔未见明显病变。与正常对照组比较,模型组PPARγ、p65、IL-17 mRNA及蛋白表达上调(P0.01)。与模型组比较,虎杖2倍剂量组及常量组p65、IL-17 mRNA及蛋白表达均下调(P0.01);PPARγmRNA蛋白表达水平上调(P0.01)。结论虎杖改善CIA模型大鼠关节滑膜免疫炎性损伤的机制,可能与调节PPARγ/NF-κB信号途径相关。     

复方青秦液对尿酸性肾病大鼠肾组织Toll样受体表达的影响

目的观察复方青秦液对尿酸性肾病大鼠肾组织Toll样受体TLR2、TLR4基因及蛋白表达的影响,探讨其肾脏保护的机制。方法将55只SD 大鼠随机分为正常组5只;模型组、阳性药组及中药大、中、小剂量组,每组各10只,用腺嘌呤灌胃伴饲酵母造模。正常组及模型组每日灌胃蒸馏水10 mL/kg,阳性药组每日灌胃别嘌醇9.33 mg/kg,中药大、中、小剂量组每日灌胃复方青秦液3.77、1.89、0.94 g/kg,连续6周。4周和6周时分别处死部分大鼠, 留取肾脏组织,RT-PCR检测TLR2、TLR4 mRNA转录水平,Western blot测定TLR2、TLR4蛋白表达水平,免疫组化测定TLR4蛋白表达水平。结果与正常组同期比较,4、6周模型组大鼠肾组织TLR4 mRNA转录水平、TLR2、TLR4蛋白表达水平升高（P〈0.05, P〈0.01）。与模型组同期比较,4、6周复方青秦液各剂量组TLR2、TLR4mRNA转录水平差异均无统计学意义（P〉0.05）,6周复方青秦液各剂量组TLR2、TLR4蛋白表达水平降低（P〈0.05, P〈0.01）。结论复方青秦液可通过降低TLR2、TLR4蛋白表达以抑制肾组织炎性病理损伤。     

藤莓汤对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜TRAF3/NF-κB信号途径的影响

目的 观察藤莓汤对胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）大鼠关节滑膜及血清肿瘤坏死因子受体作用因子3（tumor necrosis factor receptor-associated factor 3, TRAF3）、白细胞介素-23（interleukin-23, IL-23）、白细胞介素-17（interleukin-17, IL-17）、核因子-κB（nuclear factor-kappa B,NF-κB）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）表达及踝关节病理的影响,探讨该方抑制类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）滑膜免疫炎性损伤的分子机制。方法 建立CIA大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组,阳性对照组,藤莓汤大、中、小剂量组,每组各 6 只,另设正常组6只。正常组与模型组予去离子水 10 mL/（kg·d）灌胃,阳性对照组予来氟米特1. 87 mg/（kg·d）灌胃,藤莓汤大、中、小剂量组分别按照含生药量 28、14、7 g/（kg·d）藤莓汤制剂灌胃,连续干预 12 周。分别采用Real-time PCR、Western blot、ELISA技术检测TRAF3、IL-23、IL-17、NF-κB、TNF-α mRNA及蛋白表达水平,采用光镜观察踝关节病理改变。结果 与正常组比较,模型组TRAF3 mRNA转录及蛋白表达水平下调（P<0.01）,IL-23、IL-17、NF-κB 及 TNF-α mRNA转录及蛋白表达水平上调（P<0.01）。与模型组比较,藤莓汤中剂量组TRAF3 mRNA转录及蛋白表达水平上调（P<0.01, P<0.05）,藤莓汤大、中剂量组IL-23、NF-κB、IL-17、TNF-α mRNA转录及蛋白表达水平下调（P<0.01）,藤莓汤小剂量组NF-κB、IL-17 、TNF-α蛋白表达水平下调（P<0.01）。藤莓汤各剂量组CIA大鼠踝关节病理改变有不同程度改善。结论 藤莓汤改善CIA 模型大鼠滑膜免疫炎性损伤的机制可能与调节TRAF3/NF-κB信号通路相关。     

半夏芩连汤对干燥综合征模型NOD小鼠Th17/IL-17免疫炎性途径的影响

目的探讨干燥综合征（Sjgren′ssyndrome,SS）外分泌腺免疫炎性损伤的分子机制及半夏芩连汤的干预作用。方法将18只雌性NOD小鼠随机分为模型组、阳性药组、中药组,每组6只,将6只雌性Balb/c小鼠设为空白对照组。空白对照组及模型组每天予去离子水0.1mL/10g灌胃,阳性药组予雷公藤多甙片10mg/kg灌胃,中药组每天予半夏芩连汤按生药60g/kg灌胃。连续给药12周后,摘眼球取血处死,留取双侧腮腺、颌下腺组织。采用RT-PCR技术检测IL-17、IL-6、毒蕈碱样胆碱能受体3（type3muscarinicacetylcholinereceptors,M3R）、水通道蛋白5（aquaporinprotein-5,AQP5）mRNA转录水平,Westernblot技术检测M3R、AQP5蛋白表达水平,ELISA法检测IL-17、IL-6蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组IL-17、IL-6、M3R、AQP5mRNA转录及蛋白的表达水平显著上调,差异有统计学意义（P<0.01）。与模型组比较,阳性药组、中药组IL-17、IL-6、M3R、AQP5mRNA转录水平及IL-17、IL-6、M3R、AQP5蛋白表达显著下调,差异有统计学意义（P<0.01,P<0.05）。治疗组间比较,与中药组比较,阳性药组IL-17、IL-6、M3RmRNA转录水平显著下调（P<0.01）,M3R、AQP5蛋白表达显著下调（P<0.01）。结论半夏芩连汤抑制SS外分泌腺神经毒性损伤的分子机制可能与其调控Th17/IL-17免疫炎性途径相关。     

藤莓汤对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜PPARγ/NF-κB信号途径的影响

目的观察藤莓汤对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠滑膜过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator activated receptor gamma,PPARγ)、核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)、IL-17表达的影响,探讨该方抑制类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜免疫炎性病理损伤的分子机制。方法建立SD大鼠CIA模型,将成模大鼠随机分为模型组、西药组、中药高剂量组、中药低剂量组,并设正常组,每组6只。正常组与模型组予去离子水10 m L/(kg·d)灌胃,西药组予来氟米特1.87mg/(kg·d)灌胃,中药高、低剂量组分别以藤莓汤生药量31.8、15.9 g/(kg·d)灌胃,连续干预12周。干预结束后检测PPARγ、P65、IL-17蛋白及mRNA表达。结果与正常组比较,模型组PPARγ、P65、IL-17 mRNA及蛋白表达上调(P0.01)。与模型组比较,中药高剂量组PPARγ蛋白表达上调,P65、IL-17 mRNA及蛋白表达下调,差异有统计学意义(P0.01);西药组及中药低剂量组PPARγmRNA及蛋白表达上调,P65、IL-17 mRNA及蛋白表达下调,差异有统计学意义(P0.01)。结论藤莓汤可改善CIA大鼠关节滑膜病理损伤,抑制免疫炎性因子表达。     

秦苓液对尿酸性肾病大鼠肾组织AMPK/iNOS信号途径的影响

目的观察秦苓液对尿酸性肾病大鼠肾组织AMPK/iNOS信号途径的影响，探讨其对尿酸性肾病肾脏损伤的保护机制。方法采用腺嘌呤灌胃配合酵母饲料喂养的方法制备高尿酸肾病大鼠模型，将成模大鼠随机分为模型组，别嘌呤醇组［23.33 mg/（kg·d）］，秦苓液大、中、小剂量组［剂量分别为：36.4、18.2、9.1 g/（kg·d）］，每组12只，予对应药物干预。6周和8周时处死各组1/2大鼠，取肾脏组织。RT-PCR检测AMPKα1、iNOS mRNA表达水平，Western Blot检测AMPKα1、p-AMPKα1、iNOS蛋白表达水平。结果与正常组比较，6周及8周模型组AMPKα1 mRNA和蛋白表达、p-AMPKα1蛋白表达降低，iNOS mRNA及蛋白表达升高（P<0.01， P<0.05）。与模型组比较，6周时秦苓液各组AMPKα1 mRNA表达升高，p-AMPK蛋白表达升高，iNOS蛋白表达降低，秦苓液大、小剂量组AMPKα1 蛋白表达升高（P<0.01， P<0.05）；8周时秦苓液小剂量组AMPKα1 mRNA表达升高，中、小剂量组AMPKα1、p-AMPKα1蛋白表达升高，iNOS mRNA及蛋白表达降低（P<0.01， P<0.05）。结论秦苓液可能通过调节AMPK/iNOS信号途径改善代谢，抑制炎性损伤，减轻尿酸性肾病大鼠的肾脏损伤。     

补肾通督胶囊对胶原诱导关节炎大鼠RANK/RANKL/OPG系统的影响

目的研究补肾通督胶囊对胶原诱导关节炎大鼠RANK/RANKL/OPG系统的影响,为中医药治疗类风湿关节炎(RA)提供理论依据。方法 RA动物模型选用胶原诱导关节炎模型,将大鼠分为正常对照组、模型组、补肾通督胶囊低剂量组(BSL)、中剂量组(BSM)、高剂量组(BSH)和雷公藤组6组,每组7只大鼠。造模后13天开始给药,BSL、BSM及BSH组分别给予120、240及480 mg/(kg·d)的补肾通督胶囊灌胃,雷公藤组给予雷公藤多苷片24 mg/(kg·d)灌胃。各组每天灌胃1次,每次2 m L。正常对照组和模型组给予2 m L的生理盐水灌胃。共灌胃18天。于31天取材,制作踝关节TRAP切片,采用ELISA法检测血清核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)、OPG巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)。结果与正常对照组比较,模型组大鼠踝关节病理切片的阳性反应、炎症和骨破坏程度显著提高(P<0.01),血清RANKL和M-CSF水平皆有显著上升(P<0.01),而OPG和OPG/RANKL水平皆有显著降低(P<0.01)。与模型组比较,BSH组和雷公藤组阳性反应、炎症和骨破坏评分也显著下降(P<0.01);而BS各组和雷公藤组RANKL和M-CSF均显著下调,而OPG和OPG/RANKL均显著上调,差异有统计学意义(P<0.01)。与雷公藤组比较,正常组M-CSF较低,而OPG和OPG/RANKL均较高,差异有统计学意义(P<0.01),而模型组和BS各组RANKL和M-CSF均显著上调,而OPG和OPG/RANKL均显著下调(P<0.01)。结论补肾通督胶囊对于关节炎大鼠缓解骨破坏的机制,可能是通过对破骨细胞的调控起作用。